Оксидативный стресс и патозооспермия | экспериментальная и клиническая урология
Стандартное лабораторное исследование эякулята является необходимым, но недостаточным условием, для установления причины бесплодия у мужчины, особенно при его идиопатической форме. Полное исследование включает помимо морфологических методов биохимические, иммунологические и генетические тесты. В последние годы в качестве критерия нормальной фертильности эякулята используют эпигенетические методы: оценка уровня структурных нарушений ДНК и упаковки хроматина [1,2]. Проявленный интерес вызван тем обстоятельством, что, например, при варикоцеле или при воспалительном процессе в репродуктивных органах повышена генерация активных форм кислорода, вызывающих оксидативный стресс (ОС) [3-6]. Эпигенетические факторы приводят к нарушению молекулярной организации клеточных структур. При этом ряд авторов обнаруживали снижение активности антиоксидантной системы и ее компонентов, что приводило к повышению частоты фрагментации ДНК и оказывало влияние на ранние этапы эмбрионального развития [7]. Установлено также, что сперматозоиды с поврежденной ДНК сохраняют способность к оплодотворению яйцеклетки. Однако оказалось, что у партнерш мужчин с высоким уровнем повреждений ДНК в сперматозоидах повышена частота спонтанных абортов [1,4]. Обнаружено, что основными источниками фрагментации ДНК служат апоптоз и ОС [8]. Элиминация половых клеток путем апоптоза — это нормальный физиологический процесс, приводящий к ограничению числа клеток в популяции и к выбраковке аномальных сперматозоидов. При этом R. Smith и соавт. обнаружили значительное повышение маркеров апоптоза в спермоплазме [9]. Выявлена прямая связь повреждений ДНК и хроматина с воздействием активных форм кислорода и ОС [10]. По данным обзоров S.S. Chen и соавт. и R. Henkel и соавт. установлено, что в результате влияния ОС на сперматозоиды более 30% мужчин становятся субфертильными [2]. Факторами, вызывающими ОС, служат следующие внешние воздействия: электромагнитное излучение, перегревание, высокие физические нагрузки, химические вещества, токсины и др., а также внутренние: инфекции, передающиеся половым путем (ИППП), варикоцеле, курение, избыточный вес, диабет и др. [10,11].
Предприняты многочисленные попытки нейтрализовать негативное влияние ОС: устранение этиопатогенетического фактора, например, варикоцеле, ИППП; этиотропное лечение антиоксидантами, которые, как клинически установлено, имеют значимый эффект. Он состоит в повышении подвижности сперматозоидов и улучшении их морфологии. Например, после проведения варикоцелэктомии отмечается повышение целостности ДНК сперматозоидов, снижение индекса фрагментации ДНК до нормального уровня [12-14].
В связи с изложенным, целью нашего исследования явилось определение уровня ОС и антиоксидантной активности эякулята при различных видах патозооспермии, обусловленной заболеваниями органов репродуктивной системы.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Материалом для исследования служил эякулят, полученный в соответствии с рекомендациями ВОЗ 5-го издания [15]. Всего обследовано 69 мужчин в возрасте от 20 до 45 лет. В группе пациентов с варикоцеле (14 человек) диагноз установлен по данным ультразвукового исследования (УЗИ) с цветной доплерографией венозного кровотока органов мошонки. Группа с азоспермией (11 человек) состояла из пациентов с необструктивной формой азооспермии. В группу с астенозооспермией (14 человек) входили пациенты без варикоцеле и хронического простатита. Группа с нормозооспермией (14 человек) представлена фертильными мужчинами. Отдельно выделена группа пациентов с варикоцеле (16 человек), которые были обследованы до и после варикоцелэктомии.
Образцы эякулята после разжижения подвергали стандартному морфологическому изучению по рекомендациям ВОЗ. Тот же образец центрифугировали 25 мин при 3000 об/мин. Супернатант (спермо-плазму) отбирали по 200 мкл и оставляли в холодильнике при минус 80°С для определения величин исследуемых биохимических параметров.
Биохимический анализ спермоплазмы включал определение следующих параметров:
- Содержание общего белка — г/л,
- Активность супероксиддис-мутазы (СОД) — у.е./ мг белка,
- Содержание продуктов, образующихся в результате процессов перекисного окисления липидов
- (ПОЛ) и реагирующих с 2-тиобар-битуровой кислотой (ТБК-АП) -мкМ аскор ОЕ.
- Общая антиоксидантная активность (ОАА).
Выбор параметров был обусловлен тем, что СОД является основным антиоксидантным ферментом, который ответственен за утилизацию супероксиданион-радикала. Количество ТБК-АП является маркером ОС, а определение ОАА позволяет оценить состояние антиоксидантной системы.
Исследование биохимических параметров спермоплазмы проводили на кафедре биофизики биофака МГУ им. М.В. Ломоносова с использованием ряда методов, описанных в работе M. Valko и соавт. [16].
Метод определения активности СОД основан на измерении количества продукта автоокисления адреналина в щелочной среде, при образовании которого происходит генерация супероксид-анион радикалов. Этот продукт автоокисления имеет максимум поглощения при 320 нм. Активность СОД оценивали по ингибированию процесса автоокисления адреналина добавлением образцов спермоплазмы и выражали в у.е. на мг белка, где за одну условную единицу активности фермента принимали такое его количество, которое необходимо для ингибирования образования продукта автоокисления на 50%. Расчет содержания ТБК-АП продуктов проводили с учетом коэффициента молярной экстинции МДА и выражали в нмоль/мл спермоплазмы. Оптическую плотность измеряли при 532 нм. Определение ОАА спермоплазмы проводили методом, который основан на способности водорастворимых антиоксидантов восстанавливать Fe3 до Fe2 . Измеряли образовавшийся окрашенный продукт комплекса восстановленного железа с 2,4,6-трипиридилтиразином, поглощающий при 593 нм. ОАА выражали в мкМ аскорбиновой кислоты согласно калибровочной кривой.
Все измерения оптической плотности проводили на спектрофотометре Hitachi 556 (Япония).
Для обработки полученных результатов применяли методы описательной статистики с использованием программ STATISTICA. Средние значения по группам представлены в виде M±s с исключением значений, отклоняющихся от средней арифметической более, чем на 2s. Значимость различий между группами проверяли с помощью t — критерия Стъюдента и непараметрического критерия Манна-Уитни.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
В таблице 1 представлены результаты исследования эякулята в виде среднеарифметических значений параметров и их среднеквадратических ошибок (М ± s), и проценты отклонения показателя в сравнении с величиной соответствующего параметра в группе пациентов с нормозооспермией.
Таблица 1. Морфологические параметры эякулята в разных группах пациентов
| Параметр | Норма (14 чел.) | Варикоцеле (14 чел.) | Астенозооспермия (14 чел.) | Азооспермия (11чел.) |
|---|---|---|---|---|
| Объём эякулята, мл | 4,7 ± 0,4 (100%) | 3,3 ± 0,3* (70%) | 5,1 ± 0,5 (108%) | 2,7 ± 0,4* (57%) |
| Концентрация сперматозоидов, млн/мл | 72,7 ± 6,3 (100%) | 64,5 ± 6,1 (88%) | 45,7 ± 4,2* (63%) | 0 |
| Живые клетки, % | 74,7 ± 2,9 (100%) | 61,5 ± 3,5* (82%) | 55,1 ± 1,9* (73%) | 0 |
| Активная подвижность клеток, % | 31,0 ± 2,6 (100%) | 11,5 ± 2,3* (37%) | 5,4 ± 0,9* (17%) | 0 |
| Общая подвижность клеток, % | 51,5 ± 3,8 (100%) | 29,7 ± 2,5* (57%) | 19,6 ± 2,1* (38%) | 0 |
| Нормальные формы клеток, % | 34,1 ± 1,2 (100%) | 26,4 ± 1,3* (77%) | 21,3 ± 1,6* (62%) | 0 |
Несмотря на небольшие объемы групп наблюдения, все основные показатели фертильности эякулята в группе пациентов с варикоцеле имели сниженный уровень по сравнению с показателями в группе нормозооспермии. В группе пациентов с астенозооспермией все показатели, кроме объема эякулята, также характеризуются существенно более низким уровнем в сравнении с нормой и варикоцеле. Следует отметить, что во всех обследованных группах в образцах эякулята уровень лейкоцитов находился в пределах нормативных показателей, т.е. не более 1 млн/мл.
В таблице 2 представлены данные о состоянии оксидантной и антиоксидантной систем в тех же группах пациентов. В группе с варикоцеле выявлено незначительное снижение антиоксидантной активности эякулята на фоне некоторого повышения СОД. При астенозооспермии наблюдали тот же уровень, что и при нормоспермии. При азооспермии также не наблюдалось существенных отличий от нормы. Концентрация белка во всех группах находилась на одном уровне, т.е. не зависела от вида патозооспермии и не имела до- стоверных различий.
Таблица 2. Биохимические параметры спермоплазмы в разных группах пациентов
| Показатель | Норма (14 чел.) | Варикоцеле (14 чел.) | Астенозооспермия (14 чел.) | Азооспермия (11чел.) |
|---|---|---|---|---|
| Общий белок, г/л | 63,5 ± 3,9 (100%) | 56,3 ± 6,3 (88%) | 64,3 ± 5,3 (101%) | 57,6 ± 8,0 (90%) |
| FRAP, ОЕ | 1693 ± 121 (100%) | 1549 ± 119 (91%) | 1742 ± 128 (103%) | 1760± 146 (104%) |
| СОД, у.е./мг белка | 2,24 ± 0,15 (100%) | 2,65 ± 0,3 (118%) | 2,42 ± 0,26 (108%) | 2,43 ± 0,66 (108%) |
| ТБК-АП, мкМ аскор ОЕ | 2,23 ± 0,15 (100%) | 2,06 ± 0,36 (92%) | 2,27 ± 0,24 (101%) | 2,33 ± 0,23 (104%) |
В таблице 3 представлены величины морфологических параметров эякулята у пациентов отдельной группы до и после операции по поводу варикоцеле (послеоперационное обследование проведено через 3-6 месяцев). Не обнаружено значительного повышения всех показателей, однако можно выделить положительные сдвиги подвижности и морфологии сперматозоидов.
Таблица 3. Параметры эякулята у пациентов с варикоцеле (до и после варикоцелэктомии)
| Показатель | Варикоцеле до операции (8 чел) | После варикоцелэктомии (8 чел.) |
|---|---|---|
| Объём эякулята, мл | 3,3 ± 1,4 (100%) | 3,6 ± 1,3 (109%) |
| Концентрация сперматозоидов, млн/мл | 68,6 ± 15,1 (100%) | 65,0 ± 16,4 (95%) |
| Живые клетки, % | 62,0 ± 11,5 (100%) | 62,1 ± 6,7 (100%) |
| Активная подвижность клеток, % | 10,6 ± 4,3 (100%) | 13,5 ± 3,6 (127%) |
| Общая подвижность клеток, % | 29,4 ± 5,5 (100%) | 32,2 ± 4,2 (109%) |
| Нормальные формы клеток, % | 25,6 ± 11,1 (100%) | 28,0 ± 5,6 (109%) |
Таблица 4 демонстрирует изменения состояния оксидантной и антиоксидантной систем эякулята. Сравнивали биохимические показатели у пациентов с варикоцеле до операции и после операции. Обнаружено значительное повышение величины антиоксидантного показателя ОАА и ТБК-АП и одновременно существенное снижение показателя ОС (СОД). При этом концентрация белка достоверно не изменялась.
Таблица 4. Биохимические параметры спермоплазмы при варикоцеле (до и после операции)
| Показатель | Варикоцеле до операции (8 чел) | После варикоцелэктомии (8 чел.) |
|---|---|---|
| Общий белок, г/л | 57,05 ±13,8 (100%) | 56,7 ± 10,1 (99%) |
| FRAP, ОЕ | 1548 ± 218 (100%) | 2047 ± 332* (132%) |
| СОД, у.е./мг белка | 3,2 ± 0,8 (100%) | 2,4 ± 0,5* (75%) |
| ТБК-АП, мкМ аскор ОЕ | 2,2 ± 0,8 (100%) | 2,7 ± 0,5 (122%) |
ОБСУЖДЕНИЕ
Полученные результаты обследования пациентов с разными видами патозооспермии показывают наличие существенных изменений морфологических параметров сперматозоидов и в меньшей степени — биохимических параметров спермоплазмы.
Варикоцеле и астенозооспермия сопровождаются падением активной подвижности сперматозоидов до 37% и 17%, соответственно по отношению к группе с нормозооспермией. Также заметно уменьшение числа нормальных форм половых клеток: до 77% и 62%, соответственно (по сравнению с нормозооспермией). Такие изменения можно рассматривать как результат влияния ОС, что подтверждается некоторым повышением активности СОД в этих группах на 18% и 8%, как ответ на усиление продукции АФК, и соответственно снижением общей антиоксидантной активности на 9%. Несмотря на незначительные сдвиги величин клеточных параметров антиоксидантной защиты, они направлены на нейтрализацию свободных радикалов, т.е. действуют синхронно и однонаправленно. Следует также подчеркнуть, что во всех анализах эякулята количество лейкоцитов не превышало нормального уровня, т.е. отсутствовал воспалительный компонент и все обнаруживаемые изменения, вероятно, обусловлены ишемией, связанной с варикоцеле.
Обращает на себя внимание группа с азооспермией, где биохимические показатели незначительно отличались от группы с нормозооспермией, т.е. секреция этих компонентов эякулята зависит не от концентрации сперматозоидов, а от выработки их клетками эпителия придатков, семенных пузырьков, предстательной железы [9]. Наиболее показательно выглядят изменения величины параметров эякулята в отдельной группе пациентов с варикоцеле. Обследование пациентов в дооперационном периоде обнаруживает снижение параметров общей и активной подвижности сперматозоидов по отношению к нормативам ВОЗ. В постоперационном периоде(через 3-6 месяцев) отмечено незначительное улучшение характеристик морфологических параметров: активной подвижности — на 27%, общей подвижности — на 9%, морфологии — на 9%. Эти результаты совпадают с данными, полученными в других работах [11,13,14]. В этом же периоде выявлено повышение общей антиоксидантной активности эякулята на 32% и одновременно значительное снижение оксидантной активности на 25%. Известно, что супер-оксиддисмутаза инактивирует АФК, защищая сперматозоиды от оксидативного влияния. В этих условиях происходит снижение негативного эффекта ОС на эякулят и его компоненты. ОС обусловлен нарушением равновесия между продукцией активных форм кислорода и внутриклеточной антиоксидантной системой. Избыток АФК приводит к индуцированному апоптозу сперматозоидов и повреждению их ДНК.
На основании полученных результатов об улучшении морфологических характеристик сперматозоидов и биохимических показателей эякулята можно предположить, что варикоцеле является этиологическим фактором, создающим условия для появления ОС, а варикоцелэктомия нейтрализует избыток АФК и уменьшает фрагментацию ДНК, как подчеркивалось в других работах [7,12]. Оксидативный стресс имеет место только в группе больных с варикоцеле, но не у пациентов с патозооспермией, что может указывать на патогенетическую роль хронической ишемии, сопровождающей варикоцеле, в инициации избыточной продукции АФК.
Полученные результаты позволяют сделать заключение о том, что при обнаружении варикоцеле, сопровождаемого астенотератозооспермией, необходимо обследование пациента на предмет выявления степени фрагментации ДНК. Хирургическая коррекция варикоцеле приводит к повышению фертильности эякулята, по всей вероятности, за счет снижения уровня ОС, и увеличению числа клеток с нормальной упаковкой хроматина, что обеспечивает потенциал оплодотворения яйцеклетки в условиях супружеской половой жизни, либо при использовании эякулята в процедурах вспомогательных репродуктивных технологий.
ЛИТЕРАТУРА
1. Agarval A, Said TM Role of sperm chromatin abnormalities and DNA damage in male fertility. HumReprod 2003;19(4): 331-345.
2. Chen SS, Huang WJ, Chang LS, Wei YH. Attenuation of oxidative stress after varicocelectomy in subfertile patients with varicocele. J Urol 2008; 179(2): 639-642. DOI: 10.1016/j.juro.2007.09.039
3. Showell MG, Mackenzie-Proctor R, Brown J, Yazdani A, Stankiewicz MT, Hart RJ. Antioxidants for male subfertility. Cochrane Database Syst Rev 2022;19(1): CD 007411. DOI: 10.1002/14651858.CD007411.pub2
4. Lachaud C, Tesarik J, Cacadas ML, Mendoza C. Apoptosis and necrosis in human ejaculated spermatozoa. Hum Reprod 2004;19(3): 607-610. DOI: 10.1093/humrep/deh130
5. Панкратова М.С., Юсипович А.И., Воронцова М.В., Коваленко С.С., Байжуманов А.А., Паршина Е.Ю. и др. Особенности кислородного и антиоксидантного статуса крови на фоне заместительной терапии гормоном роста у детей с соматотропной недостаточностью. Проблемы эндокринологии 2022(5):10-15.
6. Seli E, Gardner DK, Sakkas D, Moffatt O, Sakkas D. Extent of nuclear DNA damage in ejaculated spermatozoa impacts on blastocyst development after in vitro fertilization. Fertil Steril 2004;82:378-383. DOI: 10.1016/ j.fertnstert.2003.12.039
7. Piomboni P, Gambera L, Serafini F, Campanella G, Morgante G, De Leo V. Sperm quality improvement after natural antioxidant tretment of asthenoteratospermic men with leucocytospermia. Asian J Androl 2008;10:201-206. DOI: 10.1111/j.1745-7262.2008.00356.x
8. Sadek A, Almohamdy AS, Zaki A, Aref M, Ibrahim SM, Mostafa T. Sperm chromatin condensation in infertile men with varicocele before and after surgical repair. Fertil Steril 2022;95(5):1705-1708. DOI: 10.1016/ j .fertnstert.2022.01.008
9. Smith R, Kaune H, Parodi D, Madariaga M, Rios R, Morales I, et al. Increased sperm DNA damage in patients with varicocele: relationship with seminal oxidative stress. Hum Reprod 2006;21(4):986-993. DOI: 10.1093/ humrep/dei429
10. Gharagozloo P, Aitken RJ The role of sperm oxidative stress in male infertility and the significance of oral antioxidant therapy. Hum Reprod 2022;26(7):1628-1640. DOI: 10.1093/humrep/der132
11. Божедомов В.А., Торопцева М.В., Ушакова И.В., Спориш Е.А., Ловыгина Н.А., Липатова Н.А. Активные формы кислорода и репродуктивная функция мужчин: фундаментальные и клинические аспекты (обзор литературы). Андрология и генитальная хирургия. 2022;(3):10-16.
12. Baaseem A, Belzile E, Ciampi A, Dohle G, Jarvi K, Salonia A, et al. Varicocele and male factor infertility treatment. Eur Urol 2022;60:796-808. DOI: 10.1016/j.eururo.2022.06.018
13. Agarval A, Prabakaran S, Allamaneni SS. Relationship between oxidative stress, varicocele and infertility: a meta-analysis. Reprod Biomed 2006;12 (5): 630-633.
14. Altunoluk B, Efe E, Kurutas EB, Gul AB, Atalay F, Eren M. Elevation of both reactive oxygen species and antioxidant enzimes in vein tissue of infertile men with varicocele. Urol Int 2022;88 (1):102-106.
15. Руководство ВОЗ по исследованию и обработке эякулята человека. 5-е изд. М. 2022. 291 с.
16. Valko M, Leibfritz D, Moncol J, Cronin MT, Mazur M, Telser J. Free radicals and antioxidans in normal physiological functhions and human disease. Int J Biochem Cell Biol 2007; 39(1):44-48. DOI: 10.1016/j.biocel.2006.07.001
§
Важность первичного звена оказания медицинской помощи, его оперативность и необходимость совершенствования организации не вызывает сомнений. Анализ мочи рассматривается, как обязательный этап в амбулаторном обследовании пациентов у врачей терапевтического, хирургического профиля.
В амбулаторных условиях анализам мочи отводится зачастую главенствующая роль. Необходимость исследования мочи для урологических пациентов невозможно переоценить, потому что это нужно для диагностики, оценки динамики заболевания и контроля эффективности его лечения [1,2].
К особенностям амбулаторного обследования и в муниципальных, и коммерческих лечебных учреждениях относится режим работы разных служб: время приема пациентов ограничено графиком работы учреждения, а лабораторные службы производят забор биологического материала для проведения анализов только в утренние часы. Таким образом, если пациент обратился к врачу после завершения времени забора биологического материала, то выполнить назначенное обследование он сможет только на следующий день или позже.Такой режим работы затрудняет диагностику и определение тактики ведения как экстренных, так и плановых пациентов. Для экстренных пациентов с одной стороны ограничивается оперативность и маневренность в оказании специализированной помощи, а с другой возрастает количество необоснованных направлений в дежурный стационар.
Если речь идет о плановом посещении врача, то пациент будет вынужден посетить лечебное учреждение несколько раз: первичный прием, забор анализов, забор результатов анализов и повторный прием врача, что совершенно не рационально при современном темпе жизни.
Поэтому работа врача будет продуктивнее, а пациент быстрее и эффективней получит помощь, если анализы могут быть выполнены в экспресс-режиме [3-5].
В настоящее время развивается перспективное направление по созданию портативных устройств с мобильным программным обеспечением для определения и монито-рирования различных биологических параметров. Некоторые из этих устройств прочно вошли в практику, другие находятся в стадии разработки [2,6,7].
В 2022 году прошел процедуру регистрации портативный анализатор мочи «ЭТТА АМП-01» на тест полосках «DIRUI H11».
«ЭТТА АМП-01» — переносной компактный прибор экспертного уровня используется для проведения экспресс-анализа проб мочи. Анализатор создан с использованием современных фотоэлектрических и микропроцессорных технологий. При анализе используются фотоэлектрическая обработка и специальные программные алгоритмы, позволяющие получить точные данные. Результаты исследования заносятся в мобильное приложение, доступное как пациенту, так и его лечащему врачу, что позволяет провести дистанционный мониторинг.
Цель настоящей работы: провести анализ результатов использования анализатора «ЭТТА АМП-01» в амбулаторных условиях на базе медицинского центра «Эргин» г. Кемерово.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Анализируемый материал сформирован на основе 140 проб мочи у пациентов, средний возраст которых составил 38,5 лет. Среди пациентов было 30 (21,4%) женщин и 110 (78,6%) — мужчин. Мужчины, включенные в обследование, обращались по поводу гиперплазии предстательной железы (ПЖ) или хронического простатита, а поводом обращения у женщин служили дизурические симптомы.
Забор мочи у исследуемых женщин из мочевого пузыря проводился стерильным катетером (Nela-ton, Ch 6), для того чтобы исключить генитальную причину дизурии.
Мужчины сдавали мочу после массажа ПЖ и забора секрета ПЖ, таким образом, получалась некоторая модификация двух-стаканной пробы.
Помимо экспресс-теста исследования мочи пациентам выполнялись цитоморфологическое исследование (ЦМФ) секрета ПЖ, уретральных соскобов мужчинам, ЦМФ соскобов из цервикального канала, заднего свода влагалища и уретры у женщин, бактериологическое исследование секрета ПЖ у мужчин, содержимого цервикального канала и мочи у женщин, а также женщинам выполнялась обзорная видеокольпоскопия при помощи видеокольпоскопа SLV-01.
Исследование проб мочи проводилось с помощью анализатора «ЭТТА АМП-01» при помощи тест-полосок «DIRUI H11», которые позволяют провести исследование по следующим 11 параметрам:
- Относительная плотность (SG);
- pH (PH);
- Глюкоза (GLU);
- Билирубин (BIL);
- Кетоновые тела (KET);
- Скрытая кровь (BLD);
- Белок (PRO);
- Уробилиноген (URO);
- Нитриты (NIT);
- Лейкоциты (LEU);
- Аскорбиновая кислота (VC).
Тест-полоски «DIRUI H11» разделены на одиннадцать сегментов, которые различаются по цвету и каждый сегмент цвет определяет содержание одного из перечисленных метаболитов.
Данный анализ относится к полуколичественным исследованиям, которые похожи на качественные тем что не определяют точного количества вещества, но указывают ориентировочное количество, выраженное в условных единицах, например: « 1», « 2», « 3» это относится к параметра с 3 по 11. Относительная плотность и рН мочи выражены в общепринятых величинах.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Сводные результаты анализов полученных при помощи «ЭТТА АМП-01» представлены в таблице 1.
Таблица 1. Результаты работы анализатора «ЭТТА-АМП 01»
| Параметры | Кол-во выявленных отклонений от нормы | Средняя величина параметра | Норма | Отклонение от нормы |
|---|---|---|---|---|
| GLU | 0 | 0 | 0 | 0 |
| BIL | 44 (31,2%) | 20,2 | 0 | 20,2 |
| SG | 0 | 1022,25 | 1015 -1025 | 0 |
| PH | 0 | 5,25 | 5-7 | 0 |
| KET | 3 (2,1%) | 1,16 | 0 | 1,16 |
| BLD | 16 (11,4%) | 55 | 0 | 55 |
| PRO | 3 (2,1%) | 0,75 | 0 | 0,75 |
| URO | 0 | 19,5 | 16 | 2,5 |
| NIT | 10 (7,14%) | 1 | 0 | 1 |
| LEU | 48 (34,2%) | 77,9 | 0 | 77,9 |
| VC | 10 (7,14%) | 1,23 | 0 | 1,23 |
Самым частым параметром, который отличался от норм, было повышенное количество лейкоцитов выявленное в 48 (34,2%) случаях. Известно, что лейкоциты в моче, собранной для анализа, быстро разрушаются. Но один из их ферментов — лейкоцитарная эстераза, на основании определения которой работают тест-полоски, не изменяется, даже когда лейкоциты уже разрушены что является очень ценным информативным свойством. Если лейкоцитарная эстераза повышена — это явный признак наличия лейкоцитов в моче.
Затем по частоте отклонений от нормы следует уровень билирубина, выявленный у 44 (31,2%) пациентов, при этом в анамнезе у 29 (65%) исследуемых были различные заболевания печени: у 7 из них был ранее установлен диагноз болезнь Жильбера, 12 — в детстве перенесли острый вирусный гепатит, у 2 — в анамнезе выполнена холецистэктомия и у 8 — была персистирующая форма хронического гепатита, по поводу чего 4 пациента наблюдаются у врача гепатолога.
Гематурия отмечалась у 16 (11,4%) пациентов, у двух пациентов — это было первое проявление опухоли мочевого пузыря, у 4 женщин имелась лейкоплакия шейки мочевого пузыря, у 7 — выявлена мочекаменная болезнь и у трех — расценено, как проявление воспалительного процесса.
Нитриты в моче появляются из нитратов, полученных с пищевыми продуктами, и вступившими во взаимодействие с нитратредуктазой, продуцируемой бактериальной микрофлорой. Обнаружение нитритов в моче свидетельствует о наличии бактериального процесса в органах мочевыводящей системы. У 10 (7,14%), исследуемых пациентов реакция на нитриты оказалась положительной, при дальнейшем обследовании по указанной выше программе, у 8 из них в бакпосевах обнаружены высокие титры микроорганизмов, таких как Enterococcus faecalis, E.coli и других до 106-8 КОЕ/г.
Известно, что метод «тест-полоски» является простым и высокочувствительным для определения аскорбиновой кислоты в моче. Среди заболеваний, при которых повышается уровень аскорбиновой кислоты в моче, на первом месте стоит мочекаменная болезнь. Аскорбиновая кислота, проходя каскад окислительных реакций, превращается в щавелевую кислоту.
Дисбаланс этого процесса приводит обменным нефропатиям и наиболее часто к оксалурии [8-9]. Обращает на себя внимание, что из 10 (7,14%) пациентов, у которых обнаружена аскорбиновая кислота, у 5 — в анамнезе была мочекаменная болезнь, 2 — являлись камневыделителями и у 7 — при эхографическом исследовании были обнаружены крупные парауретральные кальцинаты в предстательной железе.
Кетоновые тела и белок были обнаружены у 3 (2,1%) пациентов, но какой — либо связи с анамнезом и результатами дальнейшего обследования у них не было выявлено.
Уровень глюкозы в исследуемых пробах мочи не превышал нормы.
Особую группу составили пациенты с хроническим простатитом. После получения секрета ПЖ пациент собирал в стерильный контейнер первую порцию самопроизвольно выпущенной мочи. В этом анализе оценивались все параметры, но особое внимание уделялось наличию лейкоцитов. Затем полученные результаты сравнивали с цитоморфологической картиной секрета ПЖ, как с количественной, так и с ЦМФ (х1000). Сопоставление этих данных представлено в таблице 2 и рисунке 1. Для дальнейшего анализа эти пациенты были разделены на две группы по принципу наличия или отсутствия лейкоцитов в пробе мочи. Первую группу составили 62 пациента, у которых по данным анализатора в моче отсутствовали лейкоциты, а во второй группе, включавшей 48 пациентов количество лейкоцитов было от 15 до 100/мкл.
Рис. 1. Сравнение диапазона лейкоцитов в секрете предстательной железы двух групп пациентов
Таблица 2. Сравнение цитоморфологической картины секрета предстательной железы, в зависимости от уровня лейкоцитов в моче
У 49 (79,1%) пациентов из первой группы был обнаружен, нормальный секрет ПЖ (L<5), у 10 (16,1%) диапазон лейкоцитов секрета составлял 5-40 и у 3 (4,8%) — от 40 до 100. Во второй группе пациентов отмечалось следующее: лейкоциты <5 в поле зрения были у 3 (6,25%), от 5 до 40 — у 9 (18,75%) и от 40 до 100 — у 36 (75%) пациентов.
При дальнейшем изучении этих пациентов выявлена еще одна особенность. У пациентов первой группы в 27 (43,5%) случаях в посевах роста микрофлоры не обнаружено, а в позитивных бакпосевах доминировали Staph. epidermidis, Strep. agalactiae в концентрациях 103-104 КОЕ/г. Во второй группе при бактериологическом исследовании секрета ПЖ в 39 (81%) случаях выделены Enterococcus faecalis, E.coli, Staph.haemoyiticus в концентрациях 106-108 КОЕ/г с высокой степенью резистентности к основным группам антибиотиков.
Полученные результаты позволяют сделать предположение о том, что существует определенная вероятность составления прогноза о качестве секрета ПЖ на основании результатов пробы мочи, полученных с помощью анализатора ЭТТА АМП-01. Продолжение работы по составленной программе, дальнейшее накопление и анализ материала дадут более достоверные сведения.
Проведенное первичное сопоставление цитоморфологической картины секрета ПЖ, уретрального соскоба и данных анализатора пост-массажной мочи, можно расценивать, как расширенную модификацию двух-стаканной пробы, рекомендуемую для обследования пациентов с хроническим простатитом, потому что она будет давать не только характеристику воспалительного процесса, но еще 10 параметров, которые необходимо учитывать для составления следующего уровня обследования или выбора тактики лечения.
При оценке результатов анализов мочи полученных при катетеризации мочевого пузыря у женщин с дизурическими симптомами при помощи анализатора ЭТТА АМП-01 было выявлено следующее: лейкоциты от 15 до 100 /мкл были обнаружены только у 4 (14%) пациенток, а у 26 (86%) — в пробах мочи лейкоциты не были обнаружены.
Эти данные были сопоставлены результатами обзорной видеокольпоскопии (ВКС) (табл. 2). У 26 пациенток с дизурическими симптомами при ВКС были выявлены следующие патологические изменения: острый вулвовагинит, острый кольпит, острый и хронический эндоцервицит, эрозии шейки матки, как локальные, так и обширные, нагноение Ovuli Naboti, а также их сочетание. У 4 женщин была обнаружена нормальная кольпоскопическая картина.
Таблица 2. Сопоставление данных ВКС (SLV -01) c уровнем лейкоцитов в моче
Таким образом, у большинства обратившихся женщин была подтверждена генитальная природа дизурии, что принципиально меняет тактику обследования и лечения этих пациенток.
Анализ мочи, выполненный с помощью анализатора, в кратчайшие сроки, позволяет исключать генитальную природу дизурических явлений, а соответственно назначить лечение, направленное не только на вторичные проявления заболевания, но и на его причину. Что позволяет при дебюте «цистита» добиться выздоровления, а при хроническом рецидивирующем течении максимально продлить фазу ремиссии и предложить пациентке адекватные рекомендации по режиму, вариантам гигиенических процедур и составить план динамического обследования.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Опыт использования анализатора мочи ЭТТА АМП-01 на амбулаторном приеме уролога позволяет в течение 60 секунд получить разноплановую информацию, по одиннадцати параметрам мочи.
В результате работы были выявлены впервые следующие заболевания: опухоли мочевого пузыря, мочекаменная болезнь, мочекислый диатез, лейкоплакия мочевого пузыря, а также локализация и степень выраженности воспалительного процесса у женщин с дизурическими симптомами.
Практически значимым представляется, возможность документированного подтверждения хронического простатита, с помощью расширенной модификации двухстаканной пробы, выполненной в экспресс-режиме, что может широко использоваться в амбулаторной практике, потому что не требует сложного оборудования, громоздких лабораторий.
Нам представляется, что портативный анализатор мочи ЭТТА-АМП-01 имеет большое будущее. Он позволяет объективизировать полученные данные, автоматически вносить их в специально разработанное мобильное приложение, доступное для просмотра как пациенту, так и его лечащему врачу. Устройство ЭТТА АМП-01 позволяет осуществить сбор большого объема данных от целой популяции пациентов, что несомненно удобно при проведении клинических исследований и составлении баз данных пациентов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Шадеркин И.А., Владзимирский А.В., Цой А.А., Войтко Д.А., Просянников М.Ю., Зеленский М.М. Диагностическая ценность портативного анализатора мочи «ЭТТА АМП-01», как инструмента самостоятельного мониторинга в mHealth при скрининге в первичном звене медицинской помощи. Экспериментальная и клиническая урология 2022;(4): 22-26
2. Шадеркин И.А., Цой А.А., Сивков А.В., Шадеркина В.А., Войтко Д.А., Просянников М.Ю., Зеленский М.М. mHealth – новые возможности развития телекоммуникационных технологий в здравоохранении. Экспериментальная и клиническая урология 2022;(2):142-148
3. Cyriac J, Holden K, Tullus K. How to use…urine dipsticks. Arch Dis Child Educ Pract Ed. 2022;102(3):148-154. doi: 10.1136/archdischild-2022-309083
4. Shimabukro T, Naito K. Evaliation of hematuria and positivityin relation to ageing in 6,651 apparently healthy men and women. Hinyokika Kiyo 2007;53(11): 783-788.
5. Little P, Moore MV, Turner S, Rumsby K, Warner G, Lowes JA, et al. Effectivness of five different approaches in management of urinary trakt infection: randomized controlled trail. BMJ 2022; 5(340): 199. doi: 10.1136/bmj.c199.
6. Kayalp D, Dogan K, Ceylan G, Senes M, Yucel D. Can routine automaited urinalysis reduce culture request? Clin. Biochem 2022;46(13-14):1285-9. doi: 10.1016/j.clinbiochem.2022.06.015
7. Chao MR, Shih YM, Hsu YW, Liu HH1, Chang YJ, Lin BH, et al. Urinary nitrite/nitrate ratio measured by isotope-dilution LCMS/MS as a tool to screen for urinary tract infections. Free Radic Biol Med 2022;93:77-83. doi: 10.1016/j.2022.01.025. 8.Leumann E, Hoppe B. The primary hyperoxalurias. J Am Soc Nephrol 2001;12(9):1986-93.
8. Salido E, Pey AL, Rodriguez R, Lorenzo V. Primary hyperoxalurias: disorders of glyoxylate detoxification. Biochim Biophys Acta 2022;1822(9):1453-64. doi: 10.1016/j.bbadis.2022.03.004.
амбулаторная урология, портативный анализатор мочи «ЭТТА АМП-01», хронический простатит, дизурические расстройства
§
Мы не часто уделяем должное внимание людям, обеспечивающим нашу клиническую работу, тем благодаря кому мы работаем в современных операционных, на новейшем оборудовании, имеем возможность использовать последние достижения мировой науки и медицины. Нередко мы понимаем их значимость только тогда, когда их рядом уже нет…
13 июля 2022 года после тяжелой и продолжительной болезни ушел из жизни Семенченко Олег Евгеньевич – заместитель директора по административным вопросам Научно-исследовательского института урологии и интервенционной радиологии им. Н.А. Лопаткина – филиала ФГБУ «НМИРЦ» Минздрава России.
Олег Евгеньевич родился в г. Янгиабад Ташкентской области. Окончил в 1995 году Ташкентский институт автомобильного транспорта и дорог, работал на различных должностях.
С 2004 г О.Е. Семенченко возглавил хозяйственный отдел Научно-исследовательской лаборатории иммунохимиотерапии лепры в г. Сергиев Посад – филиал ФГУ «Государственный научный центр дерматовенерологии и косметологии» Минздравсоцразвития РФ, а с 2008 по 2022 год – являлся заместителем директора по общим вопросам этого института.
В ФГБУ «НИИ урологии» Минздравсоцразвития РФ Олег Евгеньевич был принят в 2022 году на должность главного инженера, а через непродолжительное время – назначен заместителем директора по административной работе.
В НИИ урологии и интервенционной радиологии им. Н.А. Лопаткина О. Е. Семенченко были осуществлены многие проекты: разработаны мероприятия по технической реконструкции и модернизации учреждения, начата реализация Федеральной адресной инвестиционной программы по строительству и реконструкции зданий и сооружений института, разрабатывались проекты, направленные на улучшение технико-экономических показателей объектов строительства и реконструкции.
В памяти сотрудников института О.Е. Семенченко останется как принципиальный, добросовестный, честно относящийся к делу и отвечающий за его результат человек. Олег Евгеньевич был уважаемым в коллективе, хорошим и веселым человеком, заботливым семьянином, отцом двух сыновей.
Руководство и коллектив НИИ урологии и интервенционной радиологии им. Н.А. Лопаткина – филиал ФГБУ «НМИРЦ» Минздрава России приносят глубокие соболезнования родным и близким Олега Евгеньевича Семенченко. Для всех нас это большая и невосполнимая потеря